Mycobacterium spp. - это комплекс Mycobacterium
tuberculosis , Mycobacterium leprae , и
атипичные микобактерии.
Попытку выделения у больных атипичных
микобактерий (независимо от ее успеха) интерпретируют, учитывая следующие
факторы.
- Некоторые атипичные микобактерии требуют специальных сред и
условий культивирования. Чтобы не пропустить инфекции, вызванные атипичными
микобактериями, о своих подозрениях заранее предупреждают врача-лаборанта.
- Атипичные микобактерии растут медленно. Даже те из них, которые
относятся к быстрорастущим микобактериям, образуют на плотных средах
различимые колонии лишь через 3-7 сут. Остальным для этого требуются
недели, либо они вообще не растут на питательных средах.
- Медленный
рост микобактерии затрудняет определение их чувствительности к
антимикробным средствам, поскольку при длительной инкубации антибиотики
нередко разрушаются. Кроме того, задержка, независимо от конечного
результата, снижает ценность исследования.
- Чувствительность
возбудителя к антимикробным средствам, определенная in vitro, далеко не
всегда соответствует клинической эффективности препаратов. Это связано с
тем, что in vitro используются концентрации, близкие к сывороточным, тогда
как ряд препаратов (например,
кларитромицин , азитромицин , клофазимин ) накапливаются в очаге
инфекции в значительно более высоких концентрациях.
- В отличие от Mycobacterium tuberculosis , атипичные
микобактерии встречаются повсеместно в окружающей среде. Поэтому их
обнаружение в нестерильном материале (например, в мокроте, моче, кале или
на коже) не может служить доказательством инфекции. Так, в Швейцарии с 1983
по 1988 г. атипичные микобактерии были выделены у 513 человек (не
инфицированных ВИЧ), но лишь 23 из них были больны. Обнаружение атипичных
микобактерии сразу у многих больных означает, скорее всего, не вспышку
больничной инфекции, а обсеменение водопроводной воды или
бронхоскопического оборудования.
Метод идентификации атипичных
микобактерии, разработанный в период между 1950 и 1980 гг., основан на
определении скорости роста, формы и цвета колоний на плотной среде, а также
биохимических свойств микроорганизмов. Эти исследования надежны и недороги,
однако занимают много времени - для идентификации возбудителя нередко
требуется 12 нед. Разумеется, это сводит на нет диагностическую ценность
метода.
Для обнаружения атипичных микобактерии в крови требуются
специальные методы.
Первый - метод лизиса-центрифугирования - состоит в
следующем: эритроциты лизируют, после чего кровь центрифугируют и
полученный осадок высевают на плотную среду. Метод позволяет оценить
концентрацию микобактерии в крови, однако некоторых из них (например, Mycobacterium genavense ) выявить не удается,
поскольку они не растут на плотных средах.
Второй метод -
радиометрический: по мере того как микобактерии метаболизиругот жидкую
среду, специальные датчики улавливают изотоп 14С в составе
высвобождающегося СО2. Метод дает возможность сократить срок обнаружения
микобактерий, но при этом не позволяет оценить форму и окраску колоний.
Для быстрой идентификации важнейших видов микобактерий ( Mycobacterium avium-intracellulare , Mycobacterium gordonae ,
Mycobacterium kansasii и комплекса
Mycobacterium tuberculosis ) сегодня используют олигонуклеотидные
зонды. При гибридизации зонда со специфическими последовательностями рРНК
микобактерии в среде развивается окраска. Двадцать лет назад
микобактериология представляла собой тихую заводь.
Туберкулез считался исчезающей инфекцией, а
заболевания, вызванные атипичными микобактериями , встречались редко и
текли хронически. Однако появился СПИД
, и микобактериадьные инфекции снова напомнили о себе. Образовалась
"гремучая смесь" - ВИЧ и Mycobacterium tuberculosis , а от
диссеминированных инфекций, вызванных атипичными микобактериями, страдает
большинство больных СПИДом .
В
такой ситуации вселяют надежду достижения молекулярной биологии, в
частности разработка методов амплификации ДНК. Они призваны ускорить
диагностику, выявить основные источники инфекции, обнаружить новые виды
атипичных микобактерий.
Благодаря новым антибиотикам - макролидам ,
рифамицинам и фторхинолонам -
расширились возможности лечения и профилактики микобактериальных инфекций.